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原位雜交-貝科新肽(推薦商家)-原位雜交技術

武漢貝科新肽科技有限公司

主營產品：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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信息詳情

以菌落原位雜交為例：對分散在若干個瓊脂平板上的少數菌落（100-200）進行篩選時，可采用該方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張纖維素濾膜上。經培養一段時間后，對菌落進行原位裂解。主平板應貯存于4℃直至得到篩選結果。

將少數菌落轉移到纖維素濾膜上

（1）在含有選擇性的瓊脂平板上放一張纖維素濾膜。

（2）用無菌牙簽將各個菌落先轉移至濾膜上，再轉移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上。應按一定的格子進行劃線接種（或打點）。每菌落應分別劃線于兩個平板的相同位置上。后，在濾膜和主平板上同時劃一個含有非重組質粒的菌落。

（3）倒置平板，于37℃培養至劃線的細菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬度。

（4）用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂，在3個以上的不對稱位置作標記。在主平板大致相同的位置上也作上標記。

（5）用Parafilm膜封好主平板，倒置貯放于4℃，直至獲得雜交反應的結果。

（6）裂解細菌，按本段下面所述方法，使釋放的DNA結合于纖維素濾膜。

①細胞特異性mRNA轉錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達和基因組進化的研究；②組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位，如EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測；③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測；④基因在染色體上的定位；⑤檢測染色體的變化，如染色體數量異常和染色體易位等；⑥分裂間期細胞遺傳學的研究，如遺傳病的產前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定，某些的診斷和生物學劑量測定等。

原位雜交技術的應用領域

原位雜交技術在醫學、農業和工業等領域都有廣泛的應用。在醫學方面，原位雜交技術可用于檢測癌細胞、病毒和細菌等致病微生物，幫助醫生制定的診斷和方案。在農業方面，原位雜交技術可用于基因定位、品種鑒定和遺傳育種等領域，提高農作物的產量和品質。在工業方面，原位雜交技術可用于檢測基因工程產品中的外源DNA，保證產品的安全性和穩定性。